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病理HE制片技术的规范和质量控制


更新时间:2006-04-22 08:38:47 作者中山大学中山医学院病理学教研室 梁英杰


(一)

病理技术是病理学诊断不可分割的一部分,正确的染色结果是病理诊断的重要依据之一。病理技术的规范与否,制片质量的好坏很大程度上影响病理医生作出正确的病理诊断。因此,保证和提高制片质量是每个病理技术员的责任。为了保证制片质量,减少差错,防范责任事故,避免医疗纠纷,有必要加强对病理技术进行科学规范管理和制片质量的控制,为提高临床病理诊断水平,促进临床病理学事业的发展作出我们应有的贡献。

1 .高素质技术人员的规范管理

1.1  作为技术员要有敬业精神和强烈的工作责任心。努力学习,刻苦钻研,掌握过硬的基本功,引进和学习新技术,工作精益求精。

1.2  科室领导应重视病理技术工作,为技术人员提供进修学习和提高的条件和机会。

1.3  技术员和医生,技术员与技术员应互相团结,密切配合,发挥团队精神的作用。

2 .仪器设备的规范管理

2.1  科室应配备工作所必须的仪器设备。先进,高质量的仪器设备是保证和提高制片质量的重要条件。

2.2  技术员对仪器设备要正确使用,定期维修保养,保证仪器设备在最佳的状态下工作。

3 .标本和资料档案的规范管理

3.1 标本和送检单的接收 

病理标本送达后,应立即检查标本和送检单的名字是否相符,有否标本,必要时要补充标本的固定液,然后将送检单编号登记。

3.2  资料档案的规范管理   

诊断报告发出后,附有诊断报告记录的送检单、玻片和组织蜡块马上存档并专人保管。建立严格的资料借出制度,确保档案资料不被丢失。

4 .技术的操作规范

4.1  组织固定  固定是把病理活体或尸体解剖切取下来的组织泡浸在适宜的化学试剂(一种或多种试剂配成的溶液),而这种化学试剂能使组织或细胞内的蛋白质凝聚、沉淀或变性,使组织细胞内的一些物质成为不溶性,同时使组织细胞原有的形态结构尽可能保持。因此,组织应及时固定,固定不当或固定不及时,都会影响组织的脱水、切片和各种染色。

固定的目的

(1)破坏细胞内的溶酶体酶。组织离体后,失去氧的供应,细胞就死亡并释放出溶酶体酶把细胞溶解,称为组织自溶。因此,组织固定的目的首先是立即杀死细胞并将溶酶体酶固定及膜性结构固定,防止细胞的自溶。

(2)杀死外来细菌。离体后的组织即失去活力,如不及时固定,就失去抵抗细菌的能力,在室温下极易使细菌生长繁殖,导致组织的腐败。

(3)尽可能保持生活体的原状。如活细胞时的微细结构,核在有丝分裂时的形态,细胞内含物的装置等。都要求通过固定保持细胞原有状态,以利于进行观察研究。

(4)凝聚、沉定细胞内原有产物,使不被溶解或消失。细胞是由蛋白质、糖类、脂类、各种无机盐和色素等组成,在固定过程中要尽可能保存各种物质为不溶性。

(5)使组织保持一定的硬度和弹性,抵抗以后的脱水、透明、浸蜡等过程不发生较大的扭曲或变形,使各级溶液在组织间隙内自由交换取得良好的制片效果。

(6)对组织的分析性染色起媒染作用。

(7)有利于区别各种细胞的折光率。固定使不同细胞或细胞内各种物质产生不同折光率,染色后利于识别各型细胞的结构。

固定液的使用和配制:

固定组织所使用由化学试剂配成的溶液称为固定液。固定液常用10%~20%福尔马林液(甲醛稀释液),甲醛易氧化成甲酸而偏酸性,因此可配成性福尔马林液。巨大组织要切开固定,小块组织的固定时间约4小时左右,然后在取材时修切成大小约22×22mm,厚不超过2mm的组织块进行脱水。

取材时必须注意核对编号是否与送检单上的病理号一致,并记录好对大体标本的描述,取材组织的形状和数量。

* 常规固定液的配制

110% 福尔马林液

 浓甲醛                            10 ml

 蒸馏水                            90 ml

2)缓冲中性福尔马林液

浓甲醛                            10 ml

PBS缓冲液(pH7.2)               90 ml

310%中性福尔马林液

浓甲醛                            10 ml

蒸馏水                            90 ml

碳酸钙                          加至饱和

* 冷冻切片固定液的配制

1)乙醚-乙醇液

无水乙醚                            1份

95%乙醇                             1份

2 乙醇--冰醋酸液

95%乙醇                          100 ml

冰醋酸                           3~5滴

* 细胞学涂片固定液的配制

1-冰醋酸液

95%乙醇                           97 ml

冰醋酸                             3 ml

2)乙醚-乙醇-冰醋酸液

乙   醚                           50 ml

95%乙醇                           50 ml

冰醋酸                             1 ml

3Carnoy’s

无水乙醇                          60 ml

氯仿                              30 ml

冰醋酸                            10 ml


(-待 续-)

 

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