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影响骨髓活检切片网状纤维染色结果的原因


作者:南方医科大学附属南方医院病理科   张彦  蔡俊杰    更新时间:2006-04-22 08:38:31  

 

白血病是造血系统恶性肿瘤,近年发病呈上升趋势,我科骨髓活检病例2002年有213例、2003年有248例、2004年为299例,但随着临床治疗水平的提高,生存期也明显延长。为此,准确的骨髓活检病理诊断对帮助临床治疗尤其重要,而网状纤维染色作为骨髓活检病理诊断的一项辅助手段,对于了解骨髓是否纤维化及纤维化程度,已成为骨髓活检常规的一门特殊染色技术,做好骨髓活检网状纤维染色具有指导性意义。

骨髓活检是用较骨穿针稍粗的穿刺针在髂骨上穿刺,在穿刺过程中带出0.5mm×5mm左右大小的一块骨髓组织,由于骨髓组织特殊的生化结构,按照常规的石蜡制片方法难以切出优质的石蜡切片,以至于染色欠佳,影响病理诊断,必须事先将骨髓组织经过脱钙处理,方法是:用浓度5%硝酸水溶液将骨髓组织进行脱钙处理20分钟,接着流水冲洗10分钟,目的在于彻底去除经硝酸脱钙的骨髓组织中的酸性物质,利于切片的细胞着色。经过上述处理后的骨髓组织,再放进组织脱水机里固定、脱水、透明、浸蜡,最后包埋、切片进行常规HE染色及网状纤维染色。

    一般而言,病理活检组织石蜡切片越薄,HE染色则颜色鲜艳,核浆蓝红分明,细胞形态就越清晰易辨,有利于作出正确的病理诊断,骨髓穿刺病理活检石蜡切片也不例外,但在需作网状纤维特殊染色时,却非石蜡切片越薄越好,切片过薄,骨髓网状纤维不完整或完全缺如,使特殊染色失败,影响染色结果的正确判断;相反,厚薄适度的石蜡切片,在特殊染色中却能获得理想的染色结果。网状纤维是网状结缔组织内的一种纤维,网状纤维纤细,直径仅约0.2~1μm,没有弹性,而有分支与韧性,穿行于细胞体和突之间,共同构成网状支桇。作者经反复实验证明,骨髓病理活检石蜡切片网状纤维染色,切片过薄2μm ,网状纤维Gomoris银染结果呈阴性,只可见呈黄棕色的胶原组织着染色;切片增厚至5μm~7μm ,网状纤维银染呈黑色网状分布,清晰可见。这与骨髓中网状纤维的形态结构及分布呈正相关,骨髓纤维化后,网状纤维明显增多,分布密集,但结构变得更微细,与网状纤维丰富的组织如淋巴结、肝脏及脑的网状纤维的结构和分布有着较大的差别,这些组织的网状纤维相对较粗大。因此,骨穿骨髓组织病理活检网状纤维染色石蜡切片应比其HE染色稍厚,同时比其它组织特殊染色如淋巴结、肝脏及脑也稍厚(以5μm~7μm 为宜),这样才能更好的显示网状纤维,切片过薄,网状纤维的结构不完整或缺如,银染结果假阴性,导致骨髓穿刺病理活检诊断上的漏诊、误诊,须引起注意。

 

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